Електрофореза какво представлява, за какво е и как е направена
Електрофорезата е лабораторна техника, осъществявана с цел разделяне на молекулите според техния размер и електрически заряд, така че да може да се постави диагнозата на заболявания, да се провери експресията на протеини или да се идентифицират микроорганизми.
Електрофорезата е проста и евтина процедура, използвана в лабораторни рутинни и изследователски проекти. Според целта на електрофорезата може да се наложи извършването на други тестове и изследвания, за да се постигне диагноза, например.
За какво е това
Електрофорезата може да се извърши за различни цели, както в изследователски проекти, така и при диагностициране, тъй като това е проста и евтина техника. По този начин електрофорезата може да се извърши за:
- Идентифицирайте вируси, гъбички, бактерии и паразити, като това приложение е по-често срещано в изследователски проекти;
- Тест за бащинство;
- Проверете експресията на протеини;
- Идентифицирайте мутациите, като например са полезни при диагностицирането на левкемия;
- Анализирайте видовете циркулиращ хемоглобин, като е полезен при диагностицирането на сърповидно-клетъчната анемия;
- Преценете количеството протеини, присъстващи в кръвта.
Според целта на електрофорезата може да се наложи извършването на други допълнителни тестове за лекаря, за да завърши диагнозата.
Как се прави
За да се извърши електрофорезата е необходимо гелът, който може да бъде от полиакриламид или агароза в зависимост от целта, буфер за електрофореза и вана, маркер за молекулно тегло и флуоресцентно багрило, в допълнение към UV или LED светлинно оборудване, познато още като трансилуминатор.
След приготвянето на гела трябва да се постави конкретен обект, така че кладенците да са направени в гела, наричан популярно гребенът, и да се остави гелът да се настрои. Когато гелът е готов, просто нанесете веществата върху кладенците. За това трябва да се постави маркер за молекулно тегло в една от ямките, положителна контрола, която е веществото, за което се знае какво е, отрицателна контрола, която гарантира валидността на реакцията, и пробите за анализ. Всички проби трябва да бъдат смесени с флуоресцентно багрило, тъй като по този начин е възможно визуализирането на лентите на трансилуминатора.
Гелът с пробите трябва да се постави във ваната за електрофореза, която съдържа специфичния буферен разтвор, след което устройството се включва така, че да има електрически ток и съответно разлика в потенциала, което е важно за разделянето частици според натоварването и размера им. Електрофоретичното време на работа варира в зависимост от целта на процедурата и може да продължи до 1 час.
След определеното време е възможно да се види резултата от електрофоретичното преминаване през трансилюминатора. Когато гелът се постави под UV или LED светлина, е възможно да се визуализира схемата на превръзка: колкото по-голяма е молекулата, толкова по-малка е миграцията й, като се доближава до ямката, докато колкото по-лека е молекулата, толкова по-голям е миграционният потенциал.
За да бъде валидирана реакцията, е необходимо лентите на положителната контрола да се визуализират и в отрицателния контрол да не се визуализира нищо, защото в противен случай това е индикация, че е имало замърсяване и целият процес трябва да се повтори.
Видове електрофореза
Електрофорезата може да се извърши за различни цели и според нейната цел могат да се използват няколко вида гел, като най-често срещаният е полиакриламид и агароза.
Електрофорезата за идентифициране на микроорганизми е по-често да се извършва в изследователски лаборатории, но за диагностични цели електрофорезата може да се използва за идентифициране на хематологични заболявания и заболявания, които се развиват с увеличаването на количеството протеини, като основните видове електрофореза :
1. Електрофореза на хемоглобина
Електрофорезата на хемоглобина е лабораторна техника, която се извършва за идентифициране на различните видове хемоглобин, циркулиращ в кръвта, което позволява да се идентифицира наличието на заболявания, свързани с синтеза на хемоглобин. Типът хемоглобин се идентифицира чрез електрофореза при специфично pH, в идеалния случай между 8.0 и 9.0, като се проверява модел на лентите, който може да бъде сравнен с нормалния модел, което позволява идентифициране на наличието на анормални хемоглобини.
За какво е направено: Хемоглобиновата електрофореза се провежда за изследване и диагностициране на заболявания, свързани с синтеза на хемоглобин, като сърповидно-клетъчна анемия и хемоглобин С, в допълнение към това, че е полезно за диференциране на таласемия. Научете как да интерпретирате електрофорезата на хемоглобина.
2. Протеин електрофореза
Протеиновата електрофореза е изпит, поискан от лекаря, за да оцени количеството протеини, циркулиращи в кръвта, и по този начин да идентифицира заболявания. Този тест се прави от кръвна проба, която се центрофугира, за да се получи плазма, онази част от кръвта, състояща се, наред с други вещества, от протеини.
След електрофореза може да се визуализира образец на ленти и впоследствие графика, в която е посочено количеството на всяка фракция протеини, което е основно за диагнозата.
За какво е направено: Протеиновата електрофореза позволява на лекаря да проучи появата на множествен миелом, дехидратация, цироза, възпаление, чернодробно заболяване, панкреатит, лупус и хипертония, според схемата на лентата и графиката, представена в доклада за изследване.
Разберете как се прави и как да разберете резултата от протеиновата електрофореза.
